Métodos para o exame parasitológico de fezes

• Amostras fecais

São examinadas devido a presença de protozoários e larvas de helmintos ou ovos. Os estágios de protozoários encontrados em fezes são trofozoítas e cistos. Os estágios de helmintos normalmente encontrados em fezes são ovos e larvas, ainda que possam ser vistos vermes adultos ou segmentos de vermes. Vermes adultos ou segmentos de tênia são normalmente visíveis a olho nu, mais ovos larvas, trofozoitas, e cistos podem ser vistos somente com microscópio.

• Identificação de parasitas em esfregaços corados

Em esfregaços corados, amebas, trofozoítas e cistos de amebas, e flagelados serão vistos. O citoplasma corara verde-azulado ou verde; o núcleo, inclusões, com células vermelhas ou bactérias corpos cromatoides e cistos de ameba e fibrilas em flagelados coração de vermelho ou púrpura. O glicogênio é dissolvido durante o processo de coloração e não é visível em preparações coradas.

• Swab anal para oxiúros

É usado para detectar a presença de oxiúros (enterobios vermiculares). Os oxiúros são mais comuns em crianças que adultos. Freqüentemente, contudo, se uma criança numa família tem oxiúros, os outros membros da família serão infectados. Ovos de oxiúros são normalmente encontrados em dobras da pele ao redor do anus. Eles raramente aparecem nas fezes.

• Esfregaço fecal espesso em celofane para diagnosticas esquistossomoses intestinais (técnica de Kato-Katz)

Essa técnica tem provado uma eficiência significante dos diagnósticos de esquistossomoses e helmintos intestinais. A técnica não é conveniente para examinar larvas, cistos ou ovos de certos parasitas intestinas.

• Método direto

No método direto as fezes são examinadas ao microscópio, entre lamina e lamínula, diluídas numa densidade que dá para se ler as letras de um jornal através do preparado.
Fezes preservadas são úteis para a detenção de cistos de protozoários e de ovos e larvas de helmintos, mas a pesquisa de trofozoítos deve ser feita, pelo método direto, com fezes frescas, não preservadas.

• Métodos de concentração de fezes

Foram descritos vários métodos de concentração de parasitos encontrados de fezes.
Eles facilitam o encontro de parasitas diminuindo as matérias fecais na preparação a ser observada ao microscópio. Concentrando os parasitos baseando nas diferenças de densidade existente entre as formas dos parasitos e o material fecal ou fazendo com que certas larvas migrem para o material fecal e sejam concentrados no fundo de um funil.
Os três métodos envolvem: a) Sedimentação, com os parasitos sendo concentradas no sedimento obtido por gravidade ou centrifugação; b) Flutuação, onde os parasitos flutuam ou são condensados num sedimento por meio de uma solução de densidade diferente da sua; c) Migração, onde certas larvas vivas migram para fora do material fecal e são coletadas no fundo de um funil.

• Método de concentração por sedimentação (ou método Hoffmann)

Este método é recomendado para a pesquisa de ovos pesados, como o do Shistosoma mansoni, revelando também ovos e larvas de outros helmintos. Mesmo não sendo ideal para a pesquisa de cistos, estes poderão ser observados, especialmente se for corado a preparação.

• Método de concentração por flutuação

Os métodos de flutuação se utilizam da centrifugação para a lavagem do material fecal, seguida da suspensão desse material em liquido de densidade determinada, cuja constituição e modo de uso dependem do método empregado.
São encontrados Schistosoma, larvas de Strongyloides, assim como cistos de protozoários,

• MIF

Centrífugo-sedimentação em um sistema éter-mertiolate. É indicado na pesquisa de larvas, ovos de helmintos e cistos de protozoários.

• Método de Ritchie

Tem como atributo principal a concentração que realiza de cistos de protozoários, ovos e larvas de helmintos. Útil para coccídios.Esta técnica é também referida como processo pelo formol-éter

• Método de Willis (ou método da solução saturada de cloreto de sódio)

Tem como fundamento a flutuação de ovos de helmintos e cistos de protozoários em uma solução saturada de NaCl em água a 30%. È indicado na pesquisa de ovos de helmintos e cistos de protozoários.
É um método ainda usado, mas devido à alta possibilidade de contaminar todo o local de trabalho, deve ser abandonado. Deveria ser imediatamente proibido em hospitais, mesmo se forem empregadas fezes preservadas. É substituído em grandes vantagens, pelos outros métodos de rotina (sedimentação e Ritchie).

• Método de Faust

A técnica de Willis (1921) foi modificada por Faust et al. (1939), na qual a solução saturada de cloreto de sódio foi substituída pela solução de sulfato de zinco. Fundamenta-se na propriedade que apresentam certos ovos de Helmintos de flutuarem na superfície de uma solução de densidade elevada e de aderirem ao vidro. Este procedimento simples e eficiente está indicado para pesquisa de ovos com densidade especifica baixa como os de Ancilostomídeos.
Foram descritas várias modificações e hoje serve tanto para fezes frescas como conservados em MIF ou em formalina.

• Métodos de concentração por migração

Baseados na extração de larvas do solo, vários autores adaptaram métodos para a pesquisa de Strongyloides stercoralis em fezes humanas. A larva desse helminto, com grande avidez à água morna, migra através do material fecal até atingir a água e aí, não tendo sustentação, sedimenta no fundo do recipiente.

• Método e Baermann

Este método é baseado no hidro-termo-tropismo positivo das larvas pela ação da gravidade. É um método seletivo para pesquisa de larvas e não específico, pois podemos encontrar cistos e ovos de outros parasitos. Indicado para a pesquisa de larvas de Strongyloides stercorales e de Ancilostomideos.

• Método de Rugai

Rugai simplificou o método de Baermann, utilizando a própria latinha como receptáculo para as fezes e um cálice de sedimentação, em vez de funil. Indicado para a pesquisa de larvas de Strongyloides stercorales e de Ancilostomideos.

• Métodos de contagem de ovos nas fezes

Em infecções de helmintos que apresentam uma liberação relativamente constante de ovos, tem sido usada a contagem de ovos para avaliação da intensidade da infecção.
Apesar de desenvolvidos para a contagem de ovos de ancilostomídeos, esses métodos têm sido usados também para a contagem de ovos de Ascaris lumbricóides e de Trichuris trichiura. As contagens são apenas estimativas, uma vez que há restrições diárias e que apresentam estreitas ligações com a dieta e com o sistema imunológico do hospedeiro.
A contagem pode ser útil na determinação do papel da infecção na doença (como, por exemplo, na anemia) e na verificação do sucesso ou não do tratamento.

• Método do esfregaço de espesso de celofane

Nesse método, desenvolvido por Kato e Miura (1954), um pedaço de celofane substitui a lamínula de vidro. É recomendado para inquéritos coprolagicos, por ser rápida e simples a preparação dos esfregaços fecais, e pelo baixo custo na pesquisa de ovos de helmintos.

• Preparações salinas

Nas preparações sem coloração são pesquisadas a presença de cistos, ovos e lavas, e a motilidade dos trofozoítas, quando presentes. Entretanto, não é possível estabelecer um diagnostico especifico, no caso de formas trofozoíticas, na base de um exame direto a fresco e temporário. Este tem somente um valor de orientação. Nesse caso as fezes deverão ser fixadas e um esfregaço fecal corado deverá ser preparado. Para pesquisa de ovos, o exame direto a fresco sem coloração oferece bons resultados, mas para o de cistos e de larvas é necessário preparar um esfregaço corado, com vistas ao estudo das características morfológicas das diferentes espécies. O primeiro exame das amostras fecais deve ser através de esfregaços salinos. Nunca deve ser usada a água corrente ou destilada, pois os trofozoítas são distorcidos podendo ser deformados e rompidos.

• Método da eclosão

As técnicas de eclosão são reconhecidas como das mais sensíveis para o diagnóstico parasitológico da esquitossomíase. Elas são indispensáveis para a avaliação da cura após tratamento, nos estudos clínicos.

• Preparações perianais

As preparações perianais são muito úteis para a detecção de infecções por Enterobius vermiicularis, podendo ser também úteis no diagnóstico de infecções por Taenia.